3/1:20919
2.9.19. МЕХАНИЧЕСКИЕ ВКЛЮЧЕНИЯ: НЕВИДИМЫЕ ЧАСТИЦЫ
Механические включения растворов для инъекций и инфузий представляют собой
посторонние подвижные нерастворимые частицы, за исключением пузырьков газа,
случайно присутствующих в растворах. Частичное загрязнение может происходить из
различных источников и их содержание должно быть сведено к минимуму независимо от
его типа. Испытание на наличие механических включений для лекарственных форм для
парентерального применения является обязательным.
Существует два метода определения механических включений, описанных ниже:
– подсчет количества частиц счетно-фотометрическим методом (блокировка светового
потока) (метод 1);
– подсчет количества частиц методом микроскопии (метод 2).
При испытании лекарственных препаратов для парентерального применения (для
инъекций и инфузий) на наличие невидимых частиц предпочтительным является
применение метода 1. Однако, при испытании образца после проведения подсчета частиц
методом cветоблокировки для получения заключения о соответствии требованиям может
возникнуть необходимость подсчета частиц методом 2. Не все лекарственные препараты
для парентерального применения могут быть испытаны на наличие невидимых частиц с
использованием одного или обоих указанных методов. В случае невозможности
применения метода 1 для испытуемых образцов, обладающих значительной
опалесценцией или вязкостью, (например, для эмульсий, коллоидных растворов и
липосомальных лекарственных препаратов), испытание проводят, используя метод 2.
Аналогичным образом, для испытуемых образцов, образующих воздушные или газовые
пузырьки при прохождении через измерительную ячейку, могут быть потребоваться
специальные меры предосторожности при пробоподготовке образца и/или проведении
испытания методом подсчета количества частиц методом микроскопии. При
значительной вязкости испытуемого образца, не позволяющей использование одного из
описанных методов, допускается количественное разбавление образца соответствующим
растворителем, свободным от механических частиц, до необходимой вязкости с
последующим испытанием. Результаты, полученные при испытании (каждой) отдельной
единицы или группы единиц испытуемого образца на наличие механических включений,
не может быть достоверно экстраполирован на другие единицы, которые не прошли
испытание. Таким образом, для правильной оценки уровня содержания механических
включений в большой серии лекарственного препарата необходимо соблюдать правила
отбора образцов и на основании результатов испытаний будет представлен
соответствующий вывод.
МЕТОД 1. ПОДСЧЕТ КОЛИЧЕСТВА ЧАСТИЦ С ПОМОЩЬЮ СВЕТОБЛОКИРОВКИ
Используют подходящий прибор, принцип действия которого основан на блокировке
светового потока, что позволяет автоматически определять размеры и количество частиц
соответствующего размера. Прибор калибруют, используя соответствующие
сертифицированные стандартные образцы, представляющие собой дисперсии
сферических частиц с известным размером от 10 мкм до 25 мкм. Стандартные образцы
диспергируют в воде, свободной от частиц, Р. Во время диспергирования следует
соблюдать осторожность, чтобы избежать агрегации частиц.
Общие указания
Испытание проводят в условиях, ограничивающих попадание механических частиц в
испытуемый образец, предпочтительно в боксе с ламинарным потоком воздуха.
Стеклянную посуду и используемую фильтрационную установку, за исключением
мембранных фильтров, тщательно моют теплым раствором моющего средства с
последующим ополаскиванием большим количеством воды для удаления его следов.
Непосредственно перед испытанием фильтрационную установку ополаскивают сверху
вниз, снаружи и затем внутри водой, свободной от частиц, Р.
Принимают меры по предупреждению попадания пузырьков воздуха в испытуемый
образец, особенно при его переносе в емкость, в которой будет проводиться испытание.
Предварительно проводят проверку пригодности условий (окружающей среды,
надлежащей очистки лабораторной посуды, отсутствия механических включений в
используемой воде) для проведения испытания.
Определяют наличие механических включений в пяти пробах воды, свободной от
частиц, Р, по 5 мл каждая, по описанной ниже методике. Если в 25 мл объединенных
пяти проб количество частиц размером 10 мкм и более превышает 25, то принятые меры
предосторожности являются недостаточными. Предварительную обработку повторяют до
тех пор, пока среда, стеклянная посуда и вода не будут пригодными для проведения
испытания.
Методика
Перемешивают содержимое образца, медленно и непрерывно переворачивают контейнер
20 раз. При необходимости осторожно удаляют колпачок. Очищают наружные
поверхности вскрываемого контейнера струей воды, свободной от частиц, Р и удаляют
элементы укупорки, избегая загрязнения содержимого. Для удаления пузырьков воздуха
испытуемый образец выдерживают в течение 2 мин или обрабатывают ультразвуком.
Для лекарственных препаратов парентеральных большого объѐма испытание проводят на
отдельные образцы. Для лекарственных препаратов парентеральных небольшого объема
(менее 25 мл) содержимое 10 или более единиц испытуемого образца объединяют до
получения объѐма не менее 25 мл. При наличии обоснования и разрешения
уполномоченного органа, допускается смешивание содержимого соответствующего
количества контейнеров и разбавления водой, свободной от частиц, Р до объема 25 мл, в
случае ее непригодности, подходящим растворителем, не содержащем механических
включений. Для лекарственных препаратов парентеральных малого объѐма (25 мл или
более) испытания могут проводиться индивидуально. Порошки, предназначенные для
парентерального применения восстанавливают водой, свободной от частиц, Р, а в случае
ее непригодности, подходящим растворителем, не содержащим механических включений.
Количество испытуемых образцов должно быть достаточным для обеспечения
статистически достоверной оценки данных. Для испытания лекарственных препаратов
парентеральных большого объѐма или небольшого объѐма, равного 25 мл или более,
допускается проведение испытания на менее 10 образцах, на основании
соответствующего плана отбора образцов. Отбирают четыре пробы, каждая объѐмом не
менее 5 мл, и определяют количество частиц размером равным 10 более 10 мкм или
равным 25 мкм и более. Исключают результат, полученный для первой пробы, и
рассчитывают среднее количество частиц в испытуемом образце.
Альтернативный методика
Данный метод предназначен для улучшения применимости испытания к биологическим
лекарственным препаратам. Однако он может быть использован для любой группы
лекарственных препаратов. Наружную поверхность вскрываемого контейнера (ов)
очищают струей воды, свободной от частиц, Р, избегая загрязнения содержимого.
Образцы для испытания готовят согласно инструкции по применению (например,
содержимое предварительно наполненного шприца).
Для лекарственных препаратов парентеральных, имеющих достаточный объем (т.е. объем,
достаточный для проведения испытания), предпочтительно испытание проводить на
отдельных образцах.
Если объем образца недостаточен, могут использовать соответствующее его количество
единиц, тщательно перемешивая каждую из них, а затем объединяя содержимое в
отдельном контейнере для получения объема, необходимого для одного испытания, в
зависимости от возможностей прибора и свойств образца.
Порошки, предназначенные для парентерального применения восстанавливают водой,
свободной от частиц, Р, а в случае ее непригодности, подходящим растворителем, не
содержащим механических включений.
Пузырьки воздуха удаляют подходящим способом, например, путем отстаивания,
применения мягкого вакуума или обработки ультразвуком. Не рекомендуется обработка
ультразвуком лекарственных препаратов, содержащих белки.
Количество образцов для испытаний должно быть достаточным для получения
статистически достоверной оценки результатов. Для лекарственных препаратов
парентеральных большого и малого объема необходимо предоставить достаточный объем
испытуемого образца для испытания; однако отдельные единицы могут быть испытаны на
основе статистически обоснованного плана отбора образцов.
Отбирают четыре приблизительно равные порции, обычно по 5 мл каждая, и
подсчитывают количество частиц размером равным 10 мкм или более и равным 25 мкм
или более. Исключают результат, полученный для первой пробы, и рассчитывают среднее
количество частиц в испытуемом образце.
Объемы испытуемых образцов менее 5 мл также могут быть подвергнуты испытанию,
при условии, что данное количество частиц соответствующим образом обосновано. В
целом, для лекарственных препаратов парентеральных, не имеющих достаточного
объема (например, менее 25 мл), проведение испытания с использованием объема от 1 мл
до 5 мл может быть приемлемым, если это допускается прибором.
Оценка результатов
К лекарственным препаратам, выпускаемым в контейнере с номинальным объѐмом более
100 мл, применяют требования испытания 1.А.
К лекарственным препаратам, выпускаемым в контейнере с номинальным объѐмом менее
100 мл, применяют требования испытания 1.В.
К лекарственным препаратам, выпускаемым в контейнере с номинальным объѐмом 100
мл, применяют требования испытания 1.В.
1
Если среднее количество частиц превышает допустимые нормы, испытание проводят,
используя подсчета количества частиц методом микроскопии.
Испытание 1.А. Растворы для инфузий или растворы для инъекций, выпускаемые в
контейнерах с номинальным объемом более 100 мл
Лекарственный препарат выдерживает испытание, если среднее количество частиц
размером 10 мкм и более не превышает 25 в одном миллилитре и количество частиц
размером 25 мкм и более не превышает 3 в одном миллилитре.
Испытание 1.В. Растворы для инфузий или растворы для инъекций, выпускаемые в
контейнерах с номинальным объемом менее 100 мл.
Лекарственный препарат выдерживает испытание, если среднее количество частиц
размером 10 мкм и более не превышает 6000 в одном контейнере и количество частиц
размером 25 мкм и более не превышает 600 в одном контейнере.
МЕТОД 2. ПОДСЧЕТ КОЛИЧЕСТВА МЕТОДОМ МИКРОСКОПИИ
Для проведения испытания используют подходящий бинокулярный микроскоп,
фильтрационную установку для сбора механических включений и мембранный фильтр.
Микроскоп оснащен окулярным микрометром, перемещаемым предметным столиком,
двумя соответствующими осветительными приборами для обеспечения эпископического
освещения в дополнение к отражающему освещению. Микроскоп настроен на (100 + 10)
кратное увеличение. Поле зрения окуляр микрометра представляет собой окружность,
разделенную по диаметру (рисунок 2.9.19.–1.) и состоит из большого круга, разделенного
перекрестиями на квадранты, прозрачные и черные стандартные окружности диаметром
10 мкм и 25 мкм при стократном увеличении и линейной шкалы с ценой деления 10 мкм.
Шкала калибруется при помощи стандартного микрометра, сертифицированного либо
национальной, либо международной метрологической организацией. Относительная
погрешность линейной шкалы допускается в пределах + 2 %. Большая окружность
определяет поле зрения масштабированной сетки. Требуется два источника света:
1) эпископический осветитель с широким полем охвата, встроенный в микроскоп;
2) внешний, фокусируемый осветитель, позволяющий обеспечить отраженное боковое
освещение под углом от 10 о до 20о.
Фильтрационная установка предназначена для удерживания механических включений и
состоит из держателя фильтра, изготовленного из стекла или другого подходящего
материала, вакуумного насоса и подходящего мембранного фильтра. Мембранный фильтр
подходящего размера может быть черного или темно-серого цвета, с нанесенной
разметкой или без разметки и должен быть с номинальным диаметром пор 1.0 мкм или
менее.
Рисунок 2.9.19.-1. Окулярная сетка, разделенная по диаметру.
Общие указания
Испытание проводят в условиях, ограничивающих попадание механических частиц в
испытуемый образец, предпочтительно в боксе с ламинарным потоком воздуха.
Лабораторную посуду и используемую фильтрационную установку, за исключением
мембранных фильтров, тщательно моют теплым раствором моющего средства с
последующим ополаскиванием большим количеством воды для удаления его следов.
Непосредственно перед испытанием ополаскивают обе стороны мембранного фильтра и
установку сверху вниз, снаружи и затем внутри водой, свободной от частиц Р.
Для проверки соответствия окружающей среды требованиям испытания, надлежащей
очистки лабораторной посуды, отсутствия механических включений в используемой воде
проводят следующее испытание: определяют наличие механических включений в 50 мл
воды, свободной от частиц, Р, по методике, описанной ниже. Если на фильтре количество
частиц размером 10 мкм и более превышает 20 или частиц размером 25 мкм и более
превышает 5, принятые меры по подготовке к испытанию являются недостаточными.
Предварительную обработку повторяют до тех пор, пока окружающая среда, стеклянная
посуда, вода и мембранный фильтр не будут пригодными для проведения испытания.
Методика
Содержимое образца перемешивают, медленно и непрерывно переворачивая контейнер
20 раз. При необходимости осторожно удаляют колпачок. Наружную поверхность
вскрываемого контейнера очищают струей воды, свободной от частиц, Р и удаляют
колпачок, избегая какого-либо загрязнения содержимого.
При испытаниях лекарственных препаратов парентеральных большого объѐма
испытывают отдельные образцы. При испытаниях лекарственных препаратов
парентеральных небольшого объѐма (менее 25 мл) содержимое 10 или более единиц
лекарственного препарата объединяют в чистой ѐмкости до получения объѐма не менее
25 мл; при наличии обоснования и разрешения уполномоченного органа допускается
приготовление испытуемого раствора путѐм смешивания содержимого подходящего
количества флаконов и разбавления водой, свободной от частиц, Р до объема 25 мл или,
в случае ее неприменимости, подходящим растворителем, не содержащем механических
включений.
Лекарственные препараты парентеральные малого объѐма (25 мл или более) могут
испытываться индивидуально. Порошки, предназначенные для парентерального
применения восстанавливают водой, свободной от частиц, Р или, в случае ее
неприменимости, подходящим растворителем, не содержащим механических включений.
Количество испытуемых образцов должно быть достаточным для обеспечения
статистически достоверной оценки данных. Для испытания лекарственных препаратов
парентеральных большого объѐма или объѐма, равного 25 мл или более, допускается
проведение испытания менее 10 образцов на основании соответствующего плана отбора
образцов.
Внутреннюю поверхность держателя фильтра, соединенного с мембранным фильтром,
увлажняют несколькими миллилитрами воды, свободной от частиц, Р. В
фильтрационную установку переносят весь раствор или объем одного образца и
фильтруют под вакуумом. При необходимости раствор добавляют постепенно порциями,
пока не профильтруется весь объем испытуемого образца. После добавления последней
порции раствора промывают внутренние стенки держателя фильтра струей воды,
свободной от частиц, Р, поддерживая вакуум до тех пор, пока на поверхности
мембранного фильтра не останется жидкости. Фильтр помещают в чашку Петри и сушат
на воздухе со слегка приоткрытой крышкой. После того, как фильтр высохнет, чашку
Петри помещают на столик микроскопа, просматривают всю поверхность фильтра в
отраженном свете и подсчитывают количество частиц размером 10 мкм и более, а также
количество частиц размером 25 мкм и более. Допускается проведение частичного
подсчета количества частиц на фильтре с последующей экстраполяцией полученного
результата на всю площадь фильтра. Рассчитывают среднее количество частиц в
испытуемых образцах. Размер частиц определяют при помощи разделенной по диаметру
масштабированной окружности путем мысленного помещения каждой частицы в круг с
последующим сравнением со стандартным кругом размером сетки 10 мкм и 25 мкм.
Таким образом, частицы не перемещают с места их первоначального расположения в
поле зрения сетки и не накладывают на стандартные круги для сравнения. Внутренний
диаметр прозрачных стандартных кругов сетки используют для определения размера
белых и прозрачных частиц, в то время как размер черных частиц определяют, используя
наружный диаметр черной непрозрачной сетки стандартных кругов.
При выполнении испытания методом подсчета количества частиц при помощи
микроскопа не следует пытаться определять размер или количество аморфных,
полужидких или других морфологически неясных материалов, имеющих вид пятна, или
обесцвечивающихся на мембранном фильтре. Эти частицы могут иметь небольшой
поверхностный рельеф, быть желеобразными или в виде пленки. В таких случаях
проводится испытание образца раствора методом подсчета количества частиц с помощью
светоблокировки.
Альтернативный метод
Данный метод предназначен для улучшения применимости испытания к биологическим
лекарственным препаратам. Однако он может быть использован для любого типа препаратов.
Очищают внешние поверхности контейнера(ов) с помощью струи воды, свободной от частиц,
Р, избегая загрязнения содержимого. Образцы тестируются в условиях использования, как
указано в инструкции по применению (например, содержимое наполненного шприца).
Для лекарственных препаратов парентеральных, имеющих достаточный объем (т.е. объем,
достаточный для проведения тестирования), предпочтительнее тестирование отдельных
единиц.
Если объем образца недостаточен, берут соответствующее количество единиц препарата,
тщательно перемешивают каждую из них, а затем соединяют содержимое в отдельном
контейнере для получения объема, необходимого для одного испытания, в зависимости от
возможностей прибора и свойств образца.
Порошки, предназначенные для парентерального применения восстанавливают водой,
свободной от частиц, Р, а в случае ее непригодности, подходящим растворителем, не
содержащим механических включений.
Количество образцов для испытаний должно быть достаточным для получения
статистически достоверной оценки результатов. Для лекарственных препаратов
парентеральных большого и малого объема необходимо предоставить достаточный объем
образца для анализа; однако отдельные единицы могут быть протестированы на основе
статистически обоснованного плана отбора образцов.
Продолжают проведение испытания, как описано выше в методе 2, начиная со слов
«Внутреннюю поверхность держателя фильтра, соединенного с мембранным фильтром,
увлажняют...».
Оценка результатов
К лекарственным препаратам, выпускаемым в контейнерах с номинальным объѐмом более 100
мл, применяют требования испытания 2.А.
К лекарственным препаратам, выпускаемым в контейнерах с номинальным объѐмом менее
100 мл, применяют требования испытания 2.В.
К лекарственным препаратам, выпускаемым в контейнерах с номинальным объѐмом 100 мл,
применяют требования испытания 2.В.
Испытание 2.А. Растворы для инфузий или растворы для инъекций, выпускаемые в
контейнерах с номинальным объемом более 100 мл
Лекарственный препарат выдерживает испытание, если среднее количество частиц
размером 10 мкм и более не превышает 12 в одном миллилитре и количество частиц
размером 25 мкм и более не превышает 2 в одном миллилитре.
Испытание 2.В. Растворы для инфузий или растворы для инъекций, выпускаемые в
контейнерах с номинальным объемом менее 100 мл
Лекарственный препарат выдерживает испытание, если в испытуемых образцах среднее
количество частиц размером 10 мкм и более не превышает 3000 в одном контейнере и
количество частиц размером 25 мкм и более не превышает 300 в одном контейнере.
